Хеликобактер пилори методы определения

Бактерия Helicobacter pylori: выявление и лечение

Часто на прием к гастроэнтерологу приходят родители, очень обеспокоенные здоровьем ребенка. Малыш отказывается есть по утрам, его укачивает в транспорте, после прогулки или занятий в школе он приходит и очень хочет есть, а после 2-3 ложек говорит, что наелся и сразу ложится отдыхать; жалуется на общую усталость, тошноту и изжогу. Изменяется характер стула: могут появиться и запоры, и диарея.

Дети самостоятельно не всегда могут описать боль, ее проявление и локализацию. Однако все вышеперечисленные симптомы могут быть проявлением воспалительных заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки, вызванных одной уникальной бактерией Helicobacter pylori (хеликобактер пилори). Ее необычность заключается в повышенной жизнеспособности и стойкости. Она любит жить в кислой среде желудка. Ни одна другая бактерия не может так длительно находиться в кислой среде. А Helicobacter pylori постепенно усиливает секрецию соляной кислоты и одновременно снижает сопротивляемость слизистой оболочки, вызывая ее воспаление.

Проведено множество исследований, в ходе которых установлено, что бактерия может присутствовать в желудке и двенадцатиперстной кишке, не вызывая каких-либо симптомов (бессимптомное инфицирование). А может вызвать боли в животе, изжогу, причем симптомы со временем нарастают. Helicobacter pylori может быть причиной образования эрозий и язв слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки у детей.

Как происходит инфицирование Helicobacter pylori?

  • от членов семьи, у которых обнаружена данная бактерия и присутствуют симптомы заболевания;
  • от друзей, с которыми ребенок часто контактирует;
  • через воду, которая заражена Helicobacter pylori;
  • очень редко бактерия может попасть в организм с пищей.

Когда нужно проводить анализ на хеликобактер у детей?

  • необходимость обследования определяет доктор;
  • у ребенка снижается аппетит, появляется слабость, он жалуется на ежедневные боли в животе (требуется консультация специалиста и обследование);
  • у одного из членов семьи выявлен Helicobacter pylori и есть симптомы заболевания, а у ребенка периодически болит живот и изменился аппетит.

Какие методы используют для определения Helicobacter pylori?

  1. Иммуноферментный анализкрови — исследование плазмы крови на специфические антитела (белки), которые образует иммунная система в ответ на появление бактерии. Титр иммуноглобулинов A, M, G используют для установления превичного диагноза. Они появляются через 2-3 недели после инфицирования.
  2. Исследование на наличие Helicobacter pylori в кале. Наиболее удобно для пациентов, поскольку безболезненно и не требует личного присутствия ребенка. Вместе с тем обнаружение бактерии в кале представляет значительные трудности. Дело в том, что при продвижении с каловыми массами через кишечник возбудитель подвергается воздействию неблагоприятных для него факторов, таких как агрессивные желчные кислоты и низкое содержание кислорода. Поэтому активные формы бактерий меняют свою форму, приспосабливаясь к изменившимся условиям, а их количество значительно снижается.
  3. Дыхательный тест ХЕЛИК-СКАН — инновационный метод экспресс-диагностики, позволяющий в течение 15 минут с высокой точностью и без привлечения лаборатории определить наличие инфекции Helicobacter pylori у детей, старше 4-х лет. Перед проведением исследования требуется специальная подготовка:исследование проводится утром строго натощак. Последний прием пищи должен быть не менее чем за 12 часов до исследования. Утром в день исследования нельзя есть, пить; отказаться от жевательной резинки. Утром перед исследованием необходимо тщательно почистить зубы и прополоскать рот. Ужин накануне исследования не должен включать мясо, рыбу, грибы. Нельзя есть бобовые (горох, фасоль, чечевицу, сою) за 3 дня до исследования. Необходимо прекратить прием антибиотиков за 4-6 недель до исследования; не принимать препараты Омепразол, Лосек, Нексиум, противовоспалительные средства, антациды и препараты висмута (Де-Нол) в течение 14 дней до исследования.
  4. Одним из самых точных является исследование биопсии, полученной при гастроэзофагодуоденоскопии. Морфологическое исследование биоптата слизистой оболочки с оценкой степени обсемененности позволяет достоверно определять Helicobacter pylori. Этот метод является «золотым стандартом» в диагностике заболеваний, вызванных данной бактерией.

Нужно ли лечить заболевания, вызванные Helicobacter pylori?

Читать еще:  Не могу высморкаться нос не заложен

Если у ребенка есть симптомы заболевания, и в ходе обследования установлено, что причина — Helicobacter pylori, терапия необходима. В Детской клинике ЕМС лечение проводится в соответствии с международными стандартами оказания медицинской помощи детям. Все назначения делаются в соответствии с протоколами лечения, принятыми в ведущих детских клиниках Западной Европы.

Источник: www.emcmos.ru

Анализ на Helicobacter pylori – как оценить результаты исследования

Helicobacter pylori – это грам-отрицательная бактерия, которая связана с заболеваниями слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки. Для обнаружения заражения этой бактерией применяются инвазивные и неинвазивные методы.

Инвазивное исследование осуществляется эндоскопически, с получением фрагмента слизистой оболочки желудка. Неинвазивные методы обнаруживают антитела IgG и IgA в крови, моче, слюне или антиген Helicobacter pylori в кале.

Когда проводится исследование на Helicobacter pylori

Helicobacter pylori – это спиральная грам-отрицательная бактерия, оснащенная несколькими жгутиками. Они обеспечивают ей возможность перемещения и проникновения через слизи, покрывающие стенки желудка на поверхность эпителиальных клеток – это происходит благодаря способности к секреции уреазы, фермента расщепляющего мочевину из крови с образованием ионов аммония и воды. Ион аммония подщелачивает окружение бактерии, что позволяет ей выживать в кислой среде желудка.

Эта опасная бактерия.

Исследование на заражение Helicobacter pylori рекомендуется провести в случае:

  • язвы двенадцатиперстной кишки;
  • язвы желудка;
  • гастрита;
  • предраковых изменений;
  • резекции желудка из-за раннего рака;
  • рака желудка в семье;
  • лимфомы типа MALT желудка;
  • полипов желудка.

Исследования на наличие H. pylori используются также для оценки эффективности лечения заражения этой бактерией.

Методы исследования Helicobacter pylori

Способы исследования Helicobacter pylori можно разделить на инвазивные и неинвазивные.

Неинвазивные методы

  • Серологический тест (иммуноферментный) – заключается в поиске в сыворотке крови, слюне или моче IgG-антител против Helicobacter pylori. Специфичность исследования сравнительно низкая и составляет около 50%. В связи с этим, иногда проводится дополнительная диагностика антител класса IgA в крови. Исследование обоих классов иммуноглобулинов, повышает ценность диагностического теста.
  • Дыхательный тест – в этом тесте пациент проглатывает мочевину, содержащую один из изотопов углерода С13 или C14. Присутствующие в желудке бактерии Helicobacter pylori расщепляют мочевину до воды и двуокиси углерода. Во время срыгивания воздуха в специальную ловушку собирают образцы, которые подвергаются анализу, направленному на определение количества изотопов углерода.
  • Посев кала – это культивирование бактерий в специальных условиях, на искусственных питательных средах.
  • Определение антигена H. pylori в образце кала при помощи специфических поликлональных антител и реакции с пероксидазой.

Инвазивные методы

Основаны на биопсии слизистой оболочки при эндоскопии верхнего отрезка желудочно-кишечного тракта.

  • Тест уреазы – если полученный фрагмент заражен Helicobacter pylori, используемая в тесте мочевина расщепляется бактериями до уреазы. Продукты разложения мочевины меняют цвет индикатора на фиолетово-красный. Этот метод является очень надежным для подтверждения инфекции и лечения.
  • Выращивание бактерий, – заключается в селекции бактерий, полученных из фрагментов ткани на специальных питательных средах.
  • Гистологическое исследование, при оценке полученного образца под микроскопом можно выявить наличие бактерий.
  • Методы ПЦР – эта техника заключается в умножение специфичного для бактерий фрагмента ДНК. Чувствительность теста на присутствие в образце ДНК бактерий составляет 50-60%.

В начале применяются неинвазивные методы для выявления инфекции H. pylori. Если они дадут отрицательный результат, но по-прежнему сохраняются подозрения на инфицирование этой бактерией, применяются инвазивные методы.

Важно сделать эти анализы, потому что если не лечить, инфекция H. pylori может вызвать тяжелые воспаления слизистой оболочки желудка, язвенные образования и даже может способствовать развитию рака.

Источник: sekretizdorovya.ru

Гастроэнтерология

  • Пищеварение
  • Питание
  • Методы обследования
  • Обследование больных с длительным субфебрилитетом
  • Обязательные исследования, предшествующие трансфузии крови и её препаратов
  • Эзофагогастродуоденоскопия
  • Колоноскопия
  • Эндоскопическая ретроградная холангиопанкреатография
  • Биопсия печени
  • Лапароскопия
  • Лучевые методы диагностики
  • Другие методы исследования
  • Функциональные тесты
  • Гастроинтестинальные гормоны
  • Диагностика helicobacter pylori
  • Гастроэнтерологические проблемы у лиц пожилого возраста
  • Диспепсия
  • Желудочно-кишечные кровотечения
  • Острые боли в животе
  • Пищевод
  • Желудок и
    12-перстная кишка
  • Печень
Читать еще:  Отзывы о ксимелин

Диагностика Helicobacter pylori

Обязательными тестами для определения Helicobacter pylori являются гистологический и уреазный.

Цитологическое исследование

Для цитологического исследования используются мазки-отпечатки (1-2 и более), полученные при эндоскопии из биоптатов слизистой оболочки (СО) антрального отдела желудка. Биоптат берется прицельно из участков с наиболее выраженными визуальными отклонениями от нормы (гиперемия, отек), но не из дна язв и эрозий. Высушенные мазки окрашиваются.

Применяемые паноптические методы окраски позволяют выявить морфологические особенности строения ядер и цитоплазмы клеток слизистой оболочки, наличие Helicobacter pylori, ориентировочно оценить количество микроорганизмов. Как правило, НР располагаются в слизи, имеют спиралевидную, изогнутую форму, могут быть S-образными. иметь вид «крыльев летящей чайки».

При изучении в цитологических препаратах можно выделить три степени обсеменённости слизистой оболочки: слабая <+) — до 20. средняя (++) — до 40, высокая (+++) — более 40 микробных тел в поле зрения при увеличении х360.

При обнаружении в мазках-отпечатках Helicobacter pylori выявляется также и клеточная инфильтрация, характеризующаяся наличием лимфоцитов, плазматических клеток, нейтрофилией и эозинофилией.

По преобладанию тех или иных клеточных элементов можно косвенно судить об активности и выраженности воспаления, кроме того, цитологическое исследование позволяет выявить в клетках слизистой оболочки наличие пролиферативных процессов и слепень их выраженности, метаплазии (кишечной в желудке и желудочной в дуоденуме), дисплазии и её степени тяжести, злокачественного новообразования. Однако цитологический метод не дает информации о структуре исследуемой слизистой оболочки.

Уреазный тест

По скорости выявления персистирующей Helicobacter pylori в слизистой оболочке цитологическому не уступает уреазный экспресс-метод, основанный на уреазной активности Helicobacter pylori. Teст состоит из геля-носителя, содержащего мочевину, бактериостатический агент и фенол-рол в качестве индикатора рН. Индикатор меняет цвет от желтого к малиновому, когда под действием уреазы происходит гидролиз мочевины с образованием аммиака, сдвигающего рН среды в щелочную сторону. Биоптат слизистой оболочки, полученный при эндоскопии, помещают в тест, Малиновое окрашивание теста, наступившее вслед за этим, свидетельствует о наличии в биоптате Helicobacter pylori. Изменение цвета среды происходит только в том случае, если в биоптате присутствует уреаза, выделенная Helicobacter pylori. Время изменения окраски теста косвенно свидетельствует о количестве жизнеспособных бактерий. Появление малинового окрашивания в течение первого часа соответствует значительной инфицированности слизистой оболочки Helicobacter pylori (+++), в течение последующих двух часов— умеренной (++), к концу суток — незначительной (+). Если же окрашивание наступает в более поздние сроки — результат считается отрицательным

Ложноотрицательные результаты имеют место у больных при слабой обсемененности слизистой оболочки. Ложные результаты исключаются при правильной обработке эндоскопов и биопсийных щипцов, Для повышения достоверности диагностики геликобактериоза рекомендуется сочетание обоих, гистологического и уреазного, методов, особенно важно их проведение не ранее чем через четыре недели после окончания антибактериального лечения, так как наличие персистирующей инфекции является основанием к проведению повторного курса комбинированной антигеликобактерной терапии.

Существует немало модификаций уреазного геста, и любой из них может оказаться полезным для диагностики геликобактериоза (например, ускоренный де-нол-тест фирмы «Яманучи Юроп», CLO-тест, Австралия, и др.).

13 С уреазный дыхательный тест

Метод неинвазивен, абсолютно безопасен, позволяет определять степень колонизации слизистой оболочки желудка Helicobacter pylori и является оптимальным для контроля эрадикационной терапии. Исследование проводится натощак, Вначале в пластиковые пробирки с интервалами в 1 мин берутся две фоновые пробы выдыхаемого воздуха. Затем принимается внутрь легкий пробный завтрак (молоко, сок и др.) и тестовый субстрат (водный раствор мочевины, меченной 13 С ). В последующем в течение часа через 15 мин берутся четыре пробы выдыхаемого воздуха.

Содержание стабилизированного изотопа в выдыхаемом воздухе определяется с помощью масс-спектрометра, В соответствии с этим рассматриваются 4 степени инфицированности Helicobacter pylori: легкая — менее 3.5%, средняя — 3,5-6,4%, тяжелая — 6,5-9.4%, крайне тяжелая — более 9,5%. В норме содержание стабилизированного изотопа 13С не превышает 1% общего количества С0 2 в выдыхаемом воздухе.

Читать еще:  Тералиджен видео

Дополнительные методы диагностики Helicobacter pylori

Микробиологический метод.

Материалом исследования для микробиологической диагностики Helicobacter pylori являются биоптаты из слизистой оболочки желудка или двенадцатиперстной кишки, полученной в условиях максимальной стерильности. Инкубация посевов осуществляется я в микроаэрофильных условиях при содержании кислорода не более 5%. Такие условия создаются путем заполнения герметически закрывающихся сосудов газовой смесью (5% кислорода, 10% углекислого газа, 85% азота), при использовании специальных газогенераторных химических пакетов. На кровяной питательной среде геликобактер на 3-5 сут. формирует мелкие круглые, гладкие, прозрачные, росинчатые колонии диаметром 1—3 мм,

В дальнейшем проводится идентификация выделенных культур, определяются их морфологические, тинкториальные свойства, чувствительность к антибиотикам, подвижность и приводятся другие специальные исследования в зависимости от возможностей и задач, стоящих перед исследователем. Воспользоваться этим методом в условиях обычной лаборатории довольно трудно.

Гистологические методы

Гистологические методы получили широкое распространение, так как позволяют быстро обнаружить Helicobacter pylori в биоптатах и одновременно изумить морфологические изменения в слизистой оболочке. Наиболее простым и доступным метолом выявления Helicobacter pylori является окраска по Гимзе без дифференцировки. Helicobacter pylori при этом окрашиваются в темно-синий цвет, они хорошо видны как на поверхности эпителия, так и в глубине ямок. Для оценки состояния слизистой оболочки и обнаружения Helicobacter pylori достаточно двух биоптатов.

Материалом может служить любой участок слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки, но при этом обязательно следует исследовать прицельно взятые биоптаты из антрального отдела в 2—3 см от привратника из участка визуально более выраженного воспаления (гиперемия, отёк). но не из дна эрозии и язвы. Частота выявления Helicobacter pylori с помощью гистологического метода хорошо корригирует с другими методами и составляет не менее 75-80%, Результативность метода зависит от многих факторов, в том числе и от способа приготовления и окраски препарата, В последнее время разработаны новые методы, среди которых наиболее чувствителен им муноцитохимический с применением моноклональных антител и комплекса авидин-биотин-пироксидазы.

Весьма обнадеживающие результаты получены при выявлении Helicobacter pylori методом гибридизации ДНК в обычных парафиновых срезах. Методика не только чувствительна, но и высокоспецифична, с ее помощью можно идентифицировать различные штаммы геликобактера и понять природу повторного обнаружения Helicobacter pylori после успешного лечения (новая ли это инфекция или размножение сохранившихся бактерий).

Иммунологические методы.

У всех больных, инфицированных Helicobacter pylori, в слизистой оболочке желудка и соответственно в двенадцатиперстной кишке образуются антитела. Специфический гуморальный иммунный ответ против антигенов геликобактера отчетливо регистрируется через 3—4 недели после инфицирования. Антитела могут быть определены различными методами (в реакции преципитации и др.), но наибольшее значение имеет метод иммуноферментного анализа (ИФА). Этим тестом выявляются антитела IgG, IgA, IgM классов в сыворотке крови, а также секреторные IgA. IgM в слюне и содержимом желудка. В практике используют ИФА по определению IgG и реже IgA-антител в сыворотке крови.

Этот метод в основном используется с целью выявления инфицированности больных с гастродуоденальной патологией и контроля эффективности антибактериального лечения в отдаленные сроки наблюдения. Преимущество метода состоит в том, что он выявляет факт инфицирования не только при манифестных, но и при субклинических формах, а также в стадии ремиссии заболевания. Следует также иметь в виду, что тест остается положительным еще не менее месяца после успешной ликвидации Helicobacter pylori, а на ранней стадии, в течение 2—3 недель с момента инфицирования, тест оказывается отрицательным.

В настоящее время в практику внедряются более совершенные методы определения Helicobacter pylori: полимеразная цепная реакция (ПЦР), определение антигена в кале и др.

Источник: gastroweb.ru

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector